前言 電泳技術(shù)的發(fā)展集中在幾個熱點領域，**近發(fā)展較快，應用廣泛的電泳包括毛細管

電泳、蛋 白雙向電泳、脈沖場電泳等。電泳技術(shù)在醫(yī)療、生化方面的應用同時也帶動了相關(guān)儀器設備 的發(fā)展，如質(zhì)譜、凝膠成像等。雖然只是生化分離分析所必需的常規(guī)儀器，但與其它大型儀 器設備一樣，電泳系統(tǒng)的進展同樣是非常迅速的。由于電泳與其它分離技術(shù)相比具有分辨 率高， 所需設備技術(shù)要求比較簡單， 操作條件溫和等優(yōu)點， 所以被廣泛應用于生物學、 醫(yī)學、 等領域中，在生化分離制備中常被用作分離步驟的**后一步?？v觀電泳技術(shù)領域，技術(shù)發(fā)展 的重心是應用電泳的原理并根據(jù)不同分離目的和分離要求以及被分離物質(zhì)的不同特性設計 出簡便、靈敏度高的電泳系統(tǒng)。從 1937 年電泳技術(shù)誕生到現(xiàn)在，經(jīng)過不斷的研究和改 進，已經(jīng)有許多種不同類型的電泳方法應用于臨床檢驗、生化分析、教學科研領域。實際應 用過程中也不斷出現(xiàn)新的要求促使電泳設備廠商不斷改進設計和研發(fā)新產(chǎn)品， 以滿足市場需 求。  2 電泳技術(shù)的進展  

2.1 毛細管電泳 

 毛細管電泳是 20 世紀 80 年代后期分析化學， 特別是生物分析化學的重大研究進展， 也是目 前發(fā)展**為迅速的電泳分離手段之一，又稱“高效毛細管電泳（HPCE），它是以高壓電場 ” 為驅(qū)動力， 以毛細管為分離通道， 依據(jù)試樣中各組分間遷移率和分配行為上的差異而實現(xiàn)分 離的一類分離技術(shù)。與傳統(tǒng)的分離方法相比，毛細管電泳的顯著特點是高效、快速和微量， 一般上樣量僅幾 nL。 這一點對于以分析為目的的電泳實驗來說， 優(yōu)勢是不言而喻的。 此外， 毛細管電泳還具備了經(jīng)濟、清潔、易于自動化、一機多用和環(huán)境污染少等優(yōu)點。  

2.2 雙向蛋白電泳  

**近興起的生物學分支—系統(tǒng)生物學是以系統(tǒng)化的觀點研究基因組和蛋白質(zhì)組內(nèi)各成員間 相互作用對生物體各部分功能的聯(lián)系和影響， 雙向電泳與質(zhì)譜的聯(lián)用是經(jīng)典的也是目前**有 效的研究方法。 雙向凝膠電泳主要用于分離細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)， 是目前蛋白質(zhì)組學研究的首要 分離分析手段。其基本原理是蛋白質(zhì)首先根據(jù)其等電點在 pH 梯度膠中等電聚焦（IEF） ，然 后按照分子量大小在 SDS-PAGE 中進行第二向分離。  3 電泳技術(shù)的應用  

3.1 醫(yī)療衛(wèi)生領域的應用 采用 HPCE 分析血清蛋白質(zhì)獲得的結(jié)果穩(wěn)定，并能準確計算

各蛋白質(zhì)的相對濃度，避免了凝 膠電泳法染色、脫色過程中多種影響因素造成的誤差，而且 HPCE 法的結(jié)果重復性好，可信 度高， 便于貯存和檢索。 前白蛋白在血清中的濃度可以表明營養(yǎng)狀態(tài)， 而且是確定惡性腫瘤、 炎癥、肝硬化、何杰金氏病的重要指標，多數(shù)電泳法難以分辨，而用 HPCE 法很容易分離定 量，檢測波長為 214 或 200nm。毛細管電泳（CE）增加了白蛋白部分的分辨率，這使得對 雙白蛋白血癥檢測的靈敏度有了很大的提高。HPCE 與 PCR 聯(lián)用可以用來對傳染性疾病、腫 瘤和遺傳病進行分子生物學的診斷。以毛細管凝膠電泳分離血液中 HIV-1 的 PCR 產(chǎn)物，并采 用紫外光和熒光檢測， 是應用較早的 PCR 產(chǎn)物的 HPCE 分析。 采用激光誘導熒光的檢測方法， 可以對 HIV-1 的 DNA 或 cDNA 擴增產(chǎn)物進行定量分析。激光誘導熒光檢測法（LIF）是目前毛 細管電泳中**靈敏的一種檢測方法，其靈敏度可高達 l0-12~l0-15mol·L-1，熒光檢測器的缺 點是僅能用于有天然熒光或易于用熒光試劑標記或染色的物質(zhì)的檢測， 而且檢測器的價格也 較高。但由于 LIF 的高靈敏度和高選擇性，它仍是毛細管電泳中不可缺少的檢測方式。在一 些惡性腫瘤疾病中， RNA 轉(zhuǎn)錄后發(fā)生修飾作用的核苷水平升高， 可以用來對腫瘤的產(chǎn)生進行 標記。利用膠束電動毛細管色譜可以對甲狀腺癌病人尿液中 15 種被修飾的核苷進行標記， 在對患白血病的兒童和患乳腺癌的婦女進行的臨床研究中， 毛細管電泳脫機與質(zhì)譜聯(lián)用鑒定 患者的核苷標記收到了較好的效果。 毛細管電泳可簡便快速分析生物樣品中各種形式的藥物 成分，在藥理學研究，法醫(yī)學檢查及臨床毒理等方面也有廣泛應用。如：抗白血病藥物胞嘧 啶-β-D-阿拉伯糖苷，經(jīng)簡單有機溶劑提取樣品，檢測限為 8μmol/L；應用膠束電動毛細管 電泳 （MECC） 可監(jiān)測類抗高血壓藥物， 在分離液中加入 SDS 和γ-環(huán)糊精， 經(jīng)有機溶劑提取， **低檢測限為 10μg/L，在臨床常規(guī)用藥的檢測方面，如抗生素類藥物阿莫西林可以不需進 行樣品的前處理，直接以血漿樣品進樣，但緩沖液中加入 SDS 可減少蛋白的管壁吸附；有的 藥物分析用 MECC 可直接分離，不必特殊處理。如平滑肌解痙藥（Flavoxate）能緩解泌尿結(jié) 石患者的疼痛，取患者尿液作 MECC 測定，檢測限可達 200μg/L。止喘藥為治療哮喘，早產(chǎn) 兒窒息的常用藥，取血清，唾液和尿液樣品，直接進樣后進行多波長測定，其線性范圍為 0~200μmol/L，濃度在 5~110μmol/L 范圍時有較好的精確度。催眠鎮(zhèn)靜類藥物臨床應用范 圍廣，品種多，易發(fā)生藥物依賴性，且中毒劑量與治療劑量接近。如需進行藥物濃度監(jiān)測， **低檢測限可達 ng/L。此外，一些重要的蛋白電泳臨床化驗項目如：同工酶測定、尿蛋白 測定等，自動化要求很高，全自動電泳分析儀應運而生。  

從歷史的角度來說， 實驗技術(shù)手段的發(fā)展因為突破了制約研究工作的瓶頸， 往往能夠給科研 工作帶來巨大的推動作用， 所以電泳技術(shù)的發(fā)展必將能夠加速醫(yī)療、 生化等領域的技術(shù)進步， 帶動國民經(jīng)濟向高技術(shù)方向的轉(zhuǎn)變。#p#分頁標題#e#