凝膠電泳，通常也稱為DNA電泳或簡(jiǎn)稱為電泳，是一種根據(jù)大小分離DNA片段（和其他帶電分子）的技術(shù)。通常使用瓊脂糖凝膠和電荷完成此步驟，以使片段彼此分離。
該技術(shù)具有許多應(yīng)用，包括檢查DNA，DNA指紋，犯罪學(xué)以及各種醫(yī)療應(yīng)用。
凝膠電泳是一項(xiàng)技術(shù)，可讓科學(xué)家根據(jù)大小分離帶電分子。這包括DNA，RNA和蛋白質(zhì)。
請(qǐng)記住，由于分子的糖-磷酸骨架中帶負(fù)電的氧分子，DNA和RNA帶有輕微的負(fù)電荷。取決于多肽鏈中的氨基酸，蛋白質(zhì)可以具有一定范圍的電荷。
為了進(jìn)行電泳，首先需要制備凝膠。這幾乎可以在任何實(shí)驗(yàn)室中完成。瓊脂糖凝膠是最常見(jiàn)的。為了制作凝膠，將瓊脂糖粉與一種稱為電泳緩沖液的特殊緩沖液混合。然后加熱該混合物直至瓊脂糖溶解并在緩沖溶液中充分混合。
請(qǐng)注意，某些電泳方案要求添加溴化乙錠（Et-Br）。這會(huì)染色電泳中使用的所有DNA，以使您可以在紫外線下查看片段的位置。
然后將其倒入稱為凝膠澆鑄托盤(pán)的矩形模具中。與產(chǎn)生用于電泳的矩形凝膠的模具一起，將梳子置于凝膠的一端。這種梳子可以將您希望通過(guò)電泳分離的樣品裝載到孔中。您可以在這里看到圖片。
凝膠硬化后，將孔梳移開(kāi)，并將凝膠放入特殊的電泳槽中。在槽中填充另一種緩沖液，直到有一小層緩沖液完全覆蓋瓊脂糖凝膠。
該罐通過(guò)緩沖溶液，再通過(guò)瓊脂糖凝膠產(chǎn)生電流（范圍為50至150 V）。瓊脂糖凝膠的孔位于電流的負(fù)極（陰極），凝膠的另一端位于電流的正極（陽(yáng)極）。
在電流通過(guò)水箱和凝膠之前，您的樣品已裝入孔中。這是使用微量移液器完成的。“標(biāo)記”樣本（也稱為DNA階梯）是具有已知DNA片段大小的樣本，可以幫助您比較樣本并了解所測(cè)試樣本的大小。
通常，將跟蹤染料（也稱為填充染料）添加到每個(gè)樣品中，以幫助您將樣品加載到孔中。染料還可以幫助您跟蹤樣品在凝膠中的運(yùn)動(dòng)。
那么樣品實(shí)際上如何在凝膠中移動(dòng)并按大小分開(kāi)？它與流過(guò)瓊脂糖凝膠的電流以及片段和瓊脂糖凝膠的大小/結(jié)構(gòu)有關(guān)。
請(qǐng)記住，總體而言，DNA電荷是負(fù)的。因此，當(dāng)將這些樣品放置在靠近電流負(fù)端的孔中時(shí)，這將導(dǎo)致帶負(fù)電荷的DNA 從陰極移走（負(fù)電荷），并在相反端移向陽(yáng)極（正電荷） 。
除了樣品的這種移動(dòng)之外，電泳還通過(guò)大小將樣品和這些樣品中的片段分離。這是因?yàn)檩^小的分子和碎片可以更快，更輕松地通過(guò)凝膠，而較大的分子和碎片則移動(dòng)更慢。這意味著小片段將比大片段更快地移至凝膠末端，因此，每個(gè)片段均按大小分開(kāi)。
凝膠運(yùn)行約一個(gè)小時(shí)（在大多數(shù)規(guī)程中）后，關(guān)閉電荷并分析凝膠。您會(huì)在凝膠的各個(gè)點(diǎn)看到一個(gè)明顯的矩形帶，通常稱為DNA帶或蛋白質(zhì)帶。每個(gè)帶代表一個(gè)沿著凝膠移動(dòng)的片段。
電泳儀在實(shí)驗(yàn)室中有許多應(yīng)用。這里僅僅是少數(shù)：
